I. preparación previa a la operación
1. limpieza y desinfección
desmontaje y limpieza: después de desmontar los componentes del reactor (tanques, tuberías, electrodos, etc.), remoje y limpie con detergente y una solución de hidróxido de sodio al 1%, Enjuague con agua purificada más de 10 veces.
tratamiento de desinfección: remoje los componentes limpios con un desinfectante (diluido proporcionalmente) durante 30 minutos y evite el contacto directo con la superficie después de secarlos.
mantenimiento del sensor: el electrodo de pH está empapado en una solución saturada de kcl, el electrodo de oxígeno disuelto (do) reemplaza el electrolito y elimina las burbujas, polarizando durante más de 6 horas.
2. montaje de tanques
instalación de sellado: alinear la tapa del tanque con la base del tanque y apretar los tornillos uniformemente en diagonal con herramientas hexagonales internas para garantizar la estanqueidad.
conexión de tubería: conecte la botella de llenado, la botella de escape, la botella de muestreo, etc. a través de un tubo de silicona o un conector rápido, y apriete manualmente los electrodos después de insertar la interfaz correspondiente.
2. operación de llenado de latas
1. vacunación celular
Después de mezclar la suspensión celular pretratada uniformemente, se cuenta, se transfiere al vial de vacunación y se conecta estérilmente con el tubo de entrada del reactor.
Utilice aire comprimido para suspender las células hidráulicas en el reactor para evitar que las células se hundan y se aglomeren.
2. iniciación de parámetros
Configuración del entorno: la temperatura se establece en 37 ° c (células de mamíferos), el oxígeno disuelto es del 40%, el pH es de unos 7,0, y el ajuste automático se activa a través del panel de control.
reabastecimiento y ventilación: la bomba peristáltica controla la velocidad de reabastecimiento, y el sistema de admisión ajusta la presión de oxígeno a 0,1 MPa para garantizar la estabilidad del oxígeno disuelto.
III. control del proceso de formación
1. monitoreo dinámico
vinculación de sensores: monitoreo en tiempo real de temperatura, ph, do y otros parámetros, el controlador ajusta automáticamente la velocidad de mezcla (100 - 300 rpm) y la velocidad de llenado.
Muestreo en línea: muestreo cada 24 horas para detectar la densidad celular y el Estado metabólico, después del muestreo, el final de la tubería se sumerge en un 75% de alcohol para prevenir la contaminación.
2. prevención y control de la contaminación
Mantenga un ambiente estéril durante toda la operación y use llamas para desinfectar la conexión para evitar la entrada de impurezas externas.
IV. operación y mantenimiento de la descarga del tanque
1. terminar el cultivo
Cierre el módulo de control automático, descargue el medio de cultivo en el cubo de residuos líquidos a través del aire comprimido y desconecte la conexión del electrodo.
2. limpieza y almacenamiento
Desmontar el componente del tanque, enjuagarlo con agua purificada y remojarlo en una solución de NaOH de 0,1m durante la noche para eliminar completamente los residuos biológicos.
Después de secar, se almacena en un lugar ventilado, y los electrodos se almacenan por separado en una caja de embalaje especial.
V. precauciones clave
1. inspección de estanqueidad: después del montaje, es necesario realizar pruebas de presión para evitar fugas durante el cultivo.
2. calibración de parámetros: antes de cada uso, es necesario corregir el pH y los electrodos do para garantizar la precisión de los datos.
3, amplificación de escala: seguir una relación constante entre el volumen de ventilación y el volumen líquido (vvm) para garantizar la eficiencia de transmisión de oxígeno disuelto consistente.
A través de los pasos anteriores, el reactor biológico celular de acero inoxidable puede lograr un cultivo celular estable desde el laboratorio hasta la escala piloto, que es adecuado para procesos biológicos de alta precisión, como la producción de anticuerpos y el desarrollo de vacunas.