El estudio fue realizado por el Departamento de biología dental y oral de la Universidad de Ciencias de la salud de hokkaido.Takeharu NiiokaEl equipo fue publicado enArchivos de Biología OralRevista. El estudio se centra en los músculos maseteros de las ratas y gira en torno a tres cuestiones:1) Si el nervio parasimpático que domina los vasos sanguíneos tiene péptidos intestinales vasoactivos..VIP) Respuesta inmune; （2Inyección intravenosaVIPSi induce relajación vascular; （3) selectividad en presencia o ausencia de atropinaVIPAntagonistas de los receptores[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEfectos sobre la relajación vascular del nervio parasimpático.

resumen

Se sabe que las fibras diastólicas vasculares del nervio parasimpático dominan los vasos sanguíneos del músculo Masetero de las ratas a través de dos mecanismos colinérgicos y no colinérgicos, pero el mecanismo no colinérgico aún no está claro. En los últimos años, los péptidos intestinales activos vasculares..VIPSe ha demostrado que participa en el proceso de relajación vascular parasimpática en la región oral y maxilofacial (por ejemplo, las glándulas submarinas y el labio inferior), pero los estudios relacionados con el músculo Masetero de las ratas son extremadamente limitados. Este estudio se ha centrado en el músculo Masetero de las ratas y tiene como objetivo evaluar:1) Si el nervio parasimpático que domina los vasos sanguíneos tieneVIPRespuesta inmune; （2Inyección intravenosaVIPSi induce relajación vascular; （3) selectividad en presencia o ausencia de atropinaVIPAntagonistas de los receptores[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEfectos sobre la relajación vascular del nervio parasimpático. El estudio encontró que en los ganglios parasimpáticos..El Dios original) y las fibras nerviosas alrededor de los vasos sanguíneos se detectaron en ambas partes.VIPRespuesta inmune. Inyección intravenosaVIPPuede inducir vasodilatación, mientras[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPPuede debilitarseVIPEfecto vasodilatador causado por la inyección. Uso por separado[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPNo puede inhibir la relajación vascular parasimpática, pero cuando[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPCuando se usa en combinación con atropina, puede debilitar la relajación vascular parasimpática. Estos resultados indican:1) presente en el nervio parasimpático postfestivo que domina los vasos sanguíneos del músculo MaseteroVIP;..2Inyección intravenosaVIPPuede inducir la relajación vascular del músculo masetero; （3) Cuando los receptores colinérgicos de los hongos están bloqueados por atropina o acetilcolina..ACh(cuando la liberación está inhibida y inactivada,VIPPuede participar en el proceso de relajación vascular parasimpática del músculo masetero.

ExperimentoMateriales e instrumentos

I) materiales experimentales

1. Animales de experimentación: machos adultosWistarRatas;

2. Rastreadores y reactivos:2%Oro fluorescente, solución salina estéril,VIP, selectividadVIPAntagonistas de los receptores[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIP, atropina, uratan, bromuro de panku;

3. Anticuerpos y reactivos relacionados con la tinción:VIPAnticuerpos, anticuerpos transportadores de acetilcolina vesical,Alexa-488Marcar burro contra conejoIgGAnticuerpos,Alexa-568Marcar burro contra cabraIgGAnticuerpos, Luciferina marcan la Lectina de castorYo、1%Suero de burro no inmune,0,3%QulatongEl X-100、0,3%Seroalbúmina bovina,4%Poliformaldehído,0.1MAmortiguador de ácido fosfórico,30%Sacarosa;

Ii) instrumentos experimentales

4. OmegawaveFLO-C1 Hemograma Doppler láser、Microscopio fluorescente、Microscopio de escaneo láser confocal、Cortadora de congelación,HamiltonMicrojeringa、Almohadilla térmica、Máquina de succión artificial、Catéteres (para intubación de la vena femoral y la arteria femoral)

OmegawaveFLO-C1Hemograma Doppler láser

Proceso experimental

1. Cría de animales y aprobación ética

2. Experimento de doble etiquetado fluorescente

3. Tinción Inmunohistoquímica

4. Medición del flujo sanguíneo del músculo Masetero: cortar el Nervio vago cervical bilateral y el tronco simpático cervical superior antes del experimento para descartar los efectos del Nervio vago y simpático. La relajación vascular reflejo del nervio parasimpático Masetero fue inducida por la estimulación eléctrica del extremo cortado del centro nervioso lingual izquierdo.OmegawaveFLO-C1 Hemograma Doppler láserMonitorear y registrar el flujo sanguíneo del músculo masetero..MBF) cambios. Inyección intravenosa de diferentes dosisVIP, ObservaciónMBFCambios; En la inyección100ng / kg VIPAntes20Min, infusión continua[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIP, observar sus paresVIPInducciónMBFEfectos del aumento. Además, después de la inyección intravenosa de atropina, la infusión continua[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPCuando, y cuando se utilizan conjuntamente, la electricidad estimula el nervio lingual, se registraMBFCambios, los resultados se expresan como porcentaje de la respuesta de control antes de la medicación.

OmegawaveFLO-C1Hemograma Doppler láser

()Una) nervio lingualLN) estimulación eléctrica (control) e inyección intravenosa de péptidos intestinales vasoactivos..VIPLas dosis son1、10 y100 ng/kg) flujo sanguíneo promedio inducidoMBF) ejemplos típicos de aumento.

b)Se resumen las inyecciones 0(solo solución salina),1、10 y100 ng/kg VIPInducción posteriorMBFAumento de la situación..n = 4). Datos conLNExpresión porcentual de la respuesta de control inducida por la estimulación eléctrica.

c)()C) en la selectividadVIPAntagonistas de los receptores..[4 -Cloro- D -Fenilalanina,Leucina[en inglés]Péptido intestinal vasoactivo,[4Cl-D-Phe]⁶de Leu¹⁷[VIP]) en presencia y ausencia, inyección100 ng/kg VIPInducciónMBFEjemplos típicos de aumento.

D)()D(...)[4Cl-D-Phe]⁶de Leu¹⁷[VIP]Correcto100 ng/kg VIPInducido por la inyecciónMBFEl efecto del incremento, expresado como porcentaje de la respuesta de pretratamiento..n = 5).

5. Análisis estadístico

Conclusiones experimentales

1. Presencia en el nervio parasimpático postfestivo que domina los vasos sanguíneos del músculo Masetero de la rataVIPInmunoreactividad, yVIPyVAChT(marcador colinérgico) en los ganglios del oídoFGLa Co - localización existe en las neuronas marcadas y en las fibras nerviosas alrededor de los vasos sanguíneos del músculo masetero;

2. Inyección intravenosaVIPLa relajación vascular del músculo Masetero se indujo de forma dependiente de la dosis en ratas y no afectó la presión arterial sistémica, selectivaVIPAntagonistas de los receptores[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPInhibibleVIPEste efecto vasodilatador inducido indicaVIPAl activarVIPLos receptores funcionan;

3. Uso por separado[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPNo tiene efecto en la relajación vascular del nervio parasimpático Masetero inducida por la estimulación del nervio lingual, y el uso de atropina solo puede debilitar parcialmente el efecto diastólico vascular; Y cuando[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPCuando se usa en combinación con atropina, puede inhibir el efecto vasodilatador, lo que sugiere que cuando los receptores muscarínicos están bloqueados por atropina o la liberación de acetilcolina está inhibida,VIPParticipar en la regulación diastólica de los vasos sanguíneos parasimpáticos del músculo masetero.