Toshiya SatoequipoPublicado enAm J Physiol Regul Integr Comp Physiol"RevistasEl artículoEl contenido de la investigación es:a través deUratanAnestesia（Uretano(...)Y la simpatectomía 2 Discusión entre ratas diabéticas y no diabéticas2 Se analizó la asociación entre la disfunción diastólica vascular del nervio parasimpático parótido asociada a la diabetes tipo 2 y la disminución de la secreción salival, y se analizó la relación y el mecanismo potencial entre la hemodinámica y la secreción salival en las tres principales glándulas salivales (parótidas, submandibulares y sublinguales).

resumen

A través de imágenes de manchas láser y métodos de recolección de saliva, enUratanAnestesia y simpatectomía 2 Se estudió la relación entre la hemodinámica y la secreción salival de las tres principales glándulas salivales en ratas diabéticas y no diabéticas. En ratas diabéticas y no diabéticas, la estimulación del nervio lingual puede aumentar rápidamente el flujo sanguíneo de las glándulas e inducir a las tres glándulas principales a secretar saliva. Aumento del flujo sanguíneo y secreción de saliva en las paperas de las ratas diabéticas en comparación con las ratas no diabéticasObvioReducir; Sin embargo, este fenómeno no se ha observado en otras glándulas, como las glándulas submandibulares y las glándulas sublinguales. Aunque la inyección intravenosa de acetilcolina puede aumentar el flujo sanguíneo parótido de manera dependiente de la dosis, esta respuesta en ratas diabéticas es menor que en ratas no diabéticas. Del mismo modo, en las glándulas parótidas de las ratas diabéticasM1yM3Receptor de la acetilcolina micótica..mAChR) deARNmLos niveles de expresión también fueron relativamente más bajos en ratas no diabéticas. Nuestros resultados muestran que,2 La diabetes tipo 2 puede dañar la función vasodilatadora parasimpática y la función secretora salival de la parótida, y sugiere que la disfunción de la vía vasodilatadora colinérgica puede ser uno de los mecanismos potenciales que conducen a la disfunción vasodilatadora de las glándulas mediada por el nervio parasimpático.

ExperimentoMateriales e instrumentos

I) materiales experimentales

Animales experimentales

¿◦ qué?2 Ratas modelo de diabetes tipo 2:8 - 10Edad de la semana (prediabetes) y45 - 50Machos de edad Zhou (diabetes crónica)OLETFRata, la rata por colecistokininaCCK(...)-1 La deficiencia de receptores provoca polialimentación e induce la regulación de genes polirecesivos y testosterona2 Diabetes tipo 2;

¿◦ qué?Ratas no diabéticas controladas: machos de la misma edadLetoRatas;

Medicamentos experimentales

¿◦ qué?Relacionado con la anestesia: soflurano,Uratan

¿◦ qué?Relajante muscular: bromuro de pancurio;

¿◦ qué?Neurotransmisores y disolventes: acetilcolina, solución salina estéril;

¿◦ qué?Reactivos de biología molecular:TRIzol/ARNmReactivos,FastStart Essential DNA Green Master (Maestro verde de ADN esencial), paraM1-M5 mAChRyβ -Actuando..β-actinaPrimer específico.

Ii) instrumentos experimentales

1. Instrumento de medición del flujo sanguíneo

Omegawave OZ-2Imagero de flujo sanguíneo de manchas láser:adoptar780 nmLa difusión láser de semiconductores irradia las glándulas para obtener un hemograma bidimensionalYA través del apoyopaletaAnálisis de software de áreas de interésDeSeñal de flujo sanguíneo;

Omegawave FLO-C1Hemograma Doppler láser:Se utiliza para monitorear los cambios en el flujo sanguíneo en el lado izquierdo del labio inferior, todos los registros se calibran con flujo sanguíneo cero y los cambios en el flujo sanguíneo se miden en unidades arbitrarias.a.u.) indica.

Omegawave FLO-C1Hemograma Doppler láser

Omegawave OZ-2Imagero de flujo sanguíneo de manchas láser

Diagrama esquemático del sitio de estimulación eléctrica de la rata, el sitio de medición del flujo sanguíneo y el método de recolección de saliva

Una: el lugar de estimulación es el nervio lingual..LNEl extremo de corte central.

B yC: sitio de medición del flujo sanguíneo:C. B.La imagen utiliza la tecnología de imagen de manchas láser para determinar las paperas..PG), glándulas submarinasSMG) y glándulas sublingualesSLG) flujo sanguíneo;CLa imagen utiliza un hemograma Doppler láser..LDF) medir el flujo sanguíneo del labio inferior.

D: método de registro de secreción de saliva: recolección de saliva a través de un catéter de polietileno a través del tubo de wharton; Colocar bolas de algodón en la boca para recoger saliva; El valor de humedad de la mucosa se determinó mediante un dispositivo de detección de humedad.

Instrumento de monitoreo de parámetros fisiológicos

Analizador de azúcar en sangre de pequeño electrodo、Máquina de succión、Analizador infrarrojo、Estimulador electrónico.

Instrumento de detección de humedad de saliva y mucosa

Detector de humedad、Tubo de polietileno, bola de algodón pesada previamente, balanza de precisión.

Proceso experimental

1. Preparación animal y manejo anestésico

2. Medición del peso corporal y el azúcar en sangre

Ayuno de ratas antes del experimento 15 Horas, pesar después de la anestesia con oflurano; Extracción de sangre de la vena caudal20 μL, conAntsense DuoEl analizador de glucosa en sangre detecta la glucosa en ayunas, medida en cada muestra2 Toma la media por segunda vez.

3. Detección del flujo sanguíneo y la conductividad vascular de las glándulas

Las ratas están acostadas horizontalmente,Omegawave FLO-C1Hemograma Doppler láserLa irradiación láser de las tres glándulas salivales principales,Omegawave OZ-2Imagero de flujo sanguíneo de manchas láserRecoger la luz dispersa para generar la imagen original de la Mancha (reflejando el número de glóbulos rojos)/.Velocidad);LDFMonitorear el flujo sanguíneo izquierdo del labio inferior.

En ratas diabéticas (círculo sólido, tamaño de muestra por grupo n = 6) con ratas no diabéticas (círculo hueco, tamaño de muestra por grupon = 6(fase prediabetiva y crónica de la diabetes, conOmegawave OZ-2Imagero de flujo sanguíneo de manchas láserMedir el flujo sanguíneo en reposo de las glándulas y el labio inferior [Unidades arbitrarias..a.u.(...)[en inglés]

4. Estimulación del nervio lingual y administración de acetilcolina

5. Secreción de saliva y medición de la humedad de la mucosa oral

6. Tiempo realRT-PCRDetecciónARNm de mAChRExpresión

7. Análisis estadístico

Conclusiones experimentales

2 La diabetes tipo 2 daña principalmente la función diastólica parasimpática y la función de secreción salival de las glándulas parótidas, mientras que tiene menos efecto en las glándulas submarinas y sublinguales; Trastornos de las vías vasodilatadoras colinérgicas (especialmenteM1,M3 mAChRLa disminución de la expresión) es un mecanismo potencial para el daño al aumento del flujo sanguíneo mediado por el nervio parasimpático parótido, y las anomalías hemodinámicas de las glándulas pueden participar en la sequedad bucal relacionada con la diabetes.xerostomía) ocurrencia.