Análisis del principio de acción del sistema de amortiguación hepes de nivel de inyección como amortiguador de arnm

En 2016, biontech publicó que el amortiguador utilizado en el líquido original de arnm en el artículo de preparación de arnm lpx - es hepes. En este estudio, se utilizó un amortiguador hepes para configurar 1 mg / ml de solución cruda de ARN para la preparación posterior de ARN - lpx.

Hepes tiene ventajas como amortiguador del sistema de respuesta ivt, que es la razón por la que combinamos la literatura relevante para deducir que biontech utiliza el par amortiguador hepes como amortiguador de arnm original.

3. las características más destacadas de los hepes en comparación con otros sistemas de amortiguación

1. el cambio de PKA con la temperatura es muy pequeño, y el pH del amortiguador cambia muy poco con la temperatura.

2. las propiedades son estables, los hepes no interactúan con otros iones, por un lado, los hepes no se complejos con otros iones para afectar las funciones de otros iones, por otro lado, la presencia de otros iones no afectará la capacidad de amortiguación de los hepes.

3. el mantenimiento del pH en el medio de cultivo celular se mantiene principalmente por el bicarbonato y el 5% de CO2 en el medio de cultivo. cuando la célula está en un ambiente abierto, la dispersión del CO2 hace que el pH aumente rápidamente fuera del rango fisiológico del ph, mientras que el Medio con pares amortiguadores hepes añadidos no tiene este problema.

4. los hepes no son fáciles de atravesar la membrana biológica y no interfieren con las reacciones bioquímicas dentro de la célula.

IV. precauciones al utilizar el sistema de amortiguación hepes

1. debido a la presencia del Grupo de paizina, cuando el hepes está expuesto a la luz, se produce h2o2, que es tóxico para las células cultivadas u otros objetos bioactivos, mientras que las sustancias sensibles a la redox no deben usarse conjuntamente, por lo que el funcionamiento del hepes como amortiguador debe llevarse a cabo en la medida de lo posible en condiciones de protección contra la luz.

2. la concentración de uso común de hepes en el campo bioquímico es de 10 - 25 mm. cuando la concentración es inferior a 10 mm, la capacidad de amortiguación es débil y no puede desempeñar un mejor efecto de amortiguación. cuando la concentración es alta, puede tener un efecto tóxico en algunas células.

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