I. requisitos reglamentarios
El GMP debe referirse a los métodos de prueba de la norma ISO para los métodos de prueba dentro de la industria farmacéutica, mientras que la normativa de control de la contaminación microbiana de la norma ISO 14698 - 1 menciona que el monitoreo microbiano requiere evaluar la eficiencia de la recolección, y los métodos de muestreo y equipos de muestreo con alta eficiencia de recolección pueden obtener datos más representativos. Para los entornos con bajos entornos de carga biológica, como los de clase A y b, se debe utilizar más el muestreo de plancton de muestreo activo que el método de muestreo pasivo de bacterias asentadas.
Se presentan orientaciones para la evaluación de la eficiencia de la recolección de muestreadores microbianos. La versión actual de 2003 de la norma iso14698 se divide en eficiencia de recolección física y eficiencia de recolección biológica para la eficiencia de recolección, en la que la eficiencia de recolección física está más preocupada por la capacidad del método de muestreo para recoger partículas portadoras de bacterias en el aire, mientras que la eficiencia de recolección biológica está más preocupada por Si el muestreador o el método de muestreo pueden garantizar la supervivencia de las partículas portadoras de bacterias mientras se recogen.
2. eficiencia del muestreo de bacterias sedimentadas
El método de muestreo pasivo basado en la gravedad puede obtener una eficiencia de recolección de 0106 CFU / H de partículas activas de 12 micras de tamaño depositadas en una placa de muestreo de 9 cm y 0256 CFU / H de partículas depositadas en una placa de muestreo de 14 cm. Por su parte, la eficiencia de recolección de partículas activas de 1 micra de tamaño depositadas en una placa de Petri de muestreo de 9 cm es de 0008 CFU / H. Si el límite de concentración máxima de Zui en la zona de nivel a es de 1cfu / m3, una placa de Petri de 9 cm necesita estar expuesta a un muestreo en la zona de nivel a durante 1.250 horas (equivalente a 52 días) para detectar un dato significativo (una cfu) en un entorno de carga de baja contaminación biológica.
Por lo tanto: las bacterias asentadas "son un método de muestreo demasiado insensible" y "las bacterias asentadas reflejan mejor el efecto de deposición de las partículas portadoras de bacterias, que solo son más sensibles cuando se toman muestras de placas planas más grandes (como 14 cm) o múltiples placas planas de muestreo". La eficiencia de recolección de partículas de 1 micra para el método de muestreo activo es 2.250 veces mayor que la eficiencia del método de bacterias de asentamiento para la recolección pasiva de 9 cm. Para el muestreo de microorganismos en el entorno laminar de la zona a, se recomienda un método de muestreo más sensible.
Los métodos de muestreo, como las bacterias asentadas, pueden utilizarse como complemento del muestreo microbiano en entornos de grado C y D de procesos no estériles con una carga microbiana relativamente alta, que se pueden utilizar juntos con el método de muestreo de bacterias planctónicas. Para los entornos de nivel a y b, el método de muestreo de bacterias planctónicas es más adecuado como un método de muestreo más eficiente.
III. riesgos en la vigilancia diaria
Como todos saben, el borrador del apéndice I de la producción aséptica de GMP en la UE fue publicado el 24 de diciembre de 2017, y los grandes cambios son:
A) se han duplicado los microorganismos y las referencias conexas (23 referencias en el apéndice original y 68 referencias en el nuevo borrador)
B) casi cuatro veces más referencias al riesgo (20 en el apéndice original y 92 en el nuevo borrador).
Por lo tanto, se puede entender que las autoridades reguladoras han prestado atención a los requisitos de microorganismos y riesgos a un nivel sin precedentes. Entre ellos, para el monitoreo diario, el nuevo apéndice 9.7 menciona que el lugar de monitoreo de partículas activas (microorganismos) en la zona de clase a debe ser el lugar con mayor riesgo de contaminación en la producción aséptica, como superficies asépticas, tapones de Goma para contenedores abiertos, etc. Y en el artículo 9.29 se menciona que el método de muestreo de partículas activas (microorganismos) no debe representar ningún riesgo de contaminación para la producción farmacéutica (referencia 2). Por lo tanto, podemos ver lo que piensan las autoridades reguladoras, que creen tanto que el monitoreo microbiano es muy importante como que el uso de métodos de muestreo inadecuados puede tener un impacto negativo en el entorno de producción.
Este es un dilema para nuestra industria. Anteriormente, debido a que muchas empresas no podían encontrar un método microbiano adecuado, temían que el cambio frecuente de placas de Petri de los métodos de muestreo de plancton causara contaminación al medio ambiente farmacéutico, por lo que decidieron no llevar a cabo el monitoreo microbiano activo (plancton). Con el desarrollo de la industria farmacéutica moderna, hemos reconocido la necesidad de mejorar nuestra evaluación de riesgos e identificación de riesgos para los métodos de muestreo microbiano.
El método de bacterias sedimentadas puede contaminar el medio ambiente, sabemos que hay una gran cantidad de agua nutritiva en la superficie de las bacterias sedimentadas, entre 10 y 20 micras, cuando las bacterias sedimentadas están expuestas a un entorno de nivel a de producción clave, es probable que esta agua nutritiva se sople en la superficie estéril, en contenedores de botellas de medicamentos, En líquidos, causando contaminación y contaminación cruzada.
Debido a que el medio de cultivo es relativamente fácil de secar, el caudal de muestreo moderno está diseñado para el muestreo de bajo caudal, que puede prolongar el tiempo de cobertura de la producción del muestreo de plancton tanto como sea posible, y no introducir con frecuencia el cambio de placa de petri. Por lo general, teniendo en cuenta el propósito de la protección del flujo de aire en el entorno laminar de nivel a, también tenemos que realizar un diseño de muestreo isodinámico para el muestreo de bacterias planctónicas, asegurando que el aire por encima del muestreador presenta un muestreo isodinámico y no contaminará el sitio.
El método tradicional de muestreo microbiano es poner todo el muestreador en un entorno de nivel a, mientras que los métodos modernos de control de procesos estériles requieren que cualquier material y equipo que entre en el nivel a sea completamente esterilizado. Los métodos tradicionales ponen el muestreador en el nivel A. debido a que los componentes eléctricos de la placa de circuito en el interior del muestreador no pueden ser completamente esterilizados, por lo general, las empresas toman muestras de VHP o alcohol para desinfectar la superficie del muestreador, lo que no puede lograr el efecto de esterilización completa. En los requisitos de control de procesos estériles de la OMS se recomienda que las empresas farmacéuticas muestreen métodos de muestreo microbiano divididos, es decir, separen la cabeza de muestreo del muestreador, que se coloca en el nivel a y puede ser esterilizada a alta temperatura o química con antelación, mientras que el muestreador se opera en un ambiente de fondo de nivel B. De esta manera, se puede evitar el impacto de la incapacidad del muestreador para esterilizar completamente en la zona A.
Conclusiones
En resumen, el método de muestreo de plancton verificado por la eficiencia es más eficiente que el método de muestreo de bacterias sedimentadas, que es adecuado para entornos de producción estériles clave y con baja carga biológica. Por su parte, el método de muestreo de bacterias sedimentadas puede utilizarse como método complementario del muestreo de bacterias planctónicas en el proceso de producción, que se puede utilizar en entornos no estériles relativamente poco críticos y con alta carga biológica, y es necesario evitar el riesgo de contaminación causado por una posición de colocación inadecuada o un funcionamiento incorrecto. Independientemente del método utilizado, la ubicación, la frecuencia de muestreo, el tiempo de cobertura del muestreo y el caudal de muestreo deben determinarse sobre la base de la evaluación del riesgo del proceso de producción.