éster Cy3 NHSCy3-N-Hidroxisuccinimida

Información del producto:

nombre del producto	especificación	almacenar	Precio (yuan)
Cy3 NHS Ester cy3 - N - hidroxisuccinimida	10 mg	- 20 ° C para evitar la luz y secar y conservar	2050.00

Proveedores:Xi 'an Kaixin Biotechnology co., Ltd.

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Descripción del producto

Cyanine 3（Cy3）， Es uno de los miembros de la familia de tintes de Luciferina de antocianinas y es un tinte de poliacetina sintético químicamente. En la actualidad, los tintes de la serie cianina se suministran en forma de dos isómeros, uno es la Antocianina no sulfonada y el otro es la Antocianina sulfonada. Las propiedades espectrales de ambos son casi consistentes, por lo que la mayoría de las aplicaciones pueden reemplazarse entre sí, por ejemplo, ambas pueden usarse para etiquetar biomoléculas como ADN o proteínas. La principal diferencia entre los dos es que los tintes sulfonados son solubles en agua, no requieren el uso de cosolventes orgánicos en el sistema de reacción de marcado de fase acuática, y reducen la posibilidad de que los tintes se acumulen en agua y mejoran la eficiencia del marcado.

Este cianina 3 (cy3) se suministra en forma de colorantes sulfonados y es fácilmente soluble en agua. Ex=555 nm，Em=565nm， Tiene las ventajas de una fluorescencia brillante, una fuerte estabilidad luminosa y una pH no sensible, y es adecuado para etiquetar biomoléculas como polipéptidos, proteínas y ácidos nucleicos para analizar proteínas objetivo a través de imágenes fluorescentes posteriores y otros métodos biológicos fluorescentes.

Este cy3 NHS ester, es decir, el cy3 que contiene el Grupo activado de N - hidroxisuccinimida (n - hidroxisuccinimida), se puede conectar directamente con el Grupo aminoácidos (- nh) en la molécula bioquímica.₂) La reacción forma un enlace amido estable, principalmente Amina primaria.

Naturaleza del producto

Alias en inglésInglés Sinónimo(...)	Cianina 3, éster monosuccinimidílico
Peso molecular..Peso Molecular(...)	829.03
Apariencia..Apariencia(...)	Sólido morado
Ex/Em	555nm / 565nm
Disolución..Solubilidad(...)	Disuelta en dmso, dmf, agua
Estructural..Estructura(...)

Métodos de transporte y conservación

Transporte de bolsas de Hielo. Conservar seco y protegido de la luz a - 20 ° c, con una validez de 1 año.

Precauciones

1) el Grupo Ester del NHS es muy sensible a la humedad y asegúrese de secar y conservar el producto. Antes de usar, el producto debe volver a la temperatura ambiente durante al menos 20 minutos.

2) la degradación del Grupo Ester del NHS ocurre en el sistema de amortiguación soluble en agua, que es una reacción competitiva. La reacción de unión a la Amina primaria de proteína / polipéptidos (concentración: 1 - 1 mg / ml) se recomienda en un rango de pH 7 - 9. Utilizando un sistema de amortiguación sin aminoácidos, pH 7-9。 Por ejemplo, 100 mm de fosfato de sodio, 150 mm de cloruro de sodio, pH 7,5; 100mM Hepes, pH 7.5。 Carbonato de sodio / bicarbonato de sodio de 100 mm, pH 8 - 9; O un amortiguador de ácido bórico de 100 mm, pH 8 - 9.

3) no use ningún amortiguador que contenga Aminas primarias, como tris, glicina.

4) para su seguridad y salud, Use ropa experimental y guantes desechables.

Método de uso (conÉster Cy3-NHSAnticuerpos marcados)

【atención] el etiquetado de polipéptidos, proteínas u otras moléculas se puede hacer con referencia a este método, y es necesario hacer ajustes adecuados en el sistema de amortiguación de etiquetado adecuado, la concentración de la muestra, la concentración de tintes y otros parámetros de acuerdo con el sistema experimental específico.

1) disuelva el anticuerpo con un tampón adecuado que no contenga aminoácidos (eg100mm fosfato de sodio, 150mm nacl, pH 7.5) para que su concentración alcance 1 - 5 mg / ML. 【Nota] si hay residuos de tris o contaminación por Glycine en los anticuerpos, es necesario diálisis o desalinización en un amortiguador adecuado.

2) antes de su uso, disolver cy3 - NHS con una cantidad adecuada de agua desionizada o Dmso anhidro para que su concentración Molecular sea 400 veces mayor que la concentración molecular de anticuerpos, por ejemplo, si la concentración de IgG a marcar es de 1 mg / ML (eg6,7 μm), la concentración de cy3 - NHS después de la disolución es de 2,7 mm; si la concentración de IgG a marcar es de 2,5 mg / ml, la concentración de cy3 - NHS después de la disolución es de 6,75 mm;

3) añadir una cantidad adecuada de reactivos cy3 - NHS a los anticuerpos para lograr la eficiencia de etiquetado esperada. 【Nota] cuando se etiquetan anticuerpos u otras proteínas con Cy 3 NHS ester, los acoplamientos con alto brillo tienen una relación tinte / proteína de 4 - 12, dependiendo de la aplicación específica. Una tasa demasiado alta puede aumentar el Fondo no específico y perder la Unión específica de anticuerpos, lo que conduce a la aglomeración. Se recomienda optimizar la tasa de marcado en función de la Aplicación.

4) incubar a temperatura ambiente durante 60 minutos (o más);

5) utilizar un tampón adecuado para diálisis o columna de desalación para eliminar los reactivos no reaccionados;

6) detectar el valor de absorción de luz de los anticuerpos cy3 - a 280 nm y 550 nm, respectivamente;

7) determinar la eficiencia del etiquetado cy3 (dol) y la concentración del etiquetado. Vea la siguiente fórmula.