El principio básico de funcionamiento de la Cromatografía líquida se basa en las diferencias en los coeficientes de distribución entre las fases fijas y móviles de los componentes de la muestra para lograr la separación. Cuando las muestras mixtas se inyectan en el sistema de cromatografía líquida, entran en la columna que contiene fases fijas (como silicona, fase de Unión química, polímero y otros materiales de partículas porosas) con fases móviles (como agua, metanol, disolvente líquido como nitrilo). Debido a las diferencias en las fuerzas de interacción entre los diferentes componentes y la fase fija (como adsorción, distribución, exclusión, afinidad, etc.), su tiempo de detención en la fase fija es diferente. Específicamente, aquellos componentes que interactúan débilmente con la fase fija y se mueven más rápido con la fase móvil salen primero de la columna; Por su parte, los componentes estrechamente combinados con la fijación se mueven más lentamente y luego salen de la columna. A través de este proceso, los componentes de la mezcla se separan uno por uno. Además, el efecto de separación no solo depende de la diferencia en el coeficiente de distribución del soluto entre las dos fases (factor termodinámico), sino que también se ve afectado por factores dinámicos como el coeficiente de difusión, el tamaño del grano de la fase fija, el Estado de llenado de la columna y la velocidad de flujo de la fase móvil.

Precauciones para el uso de la cromatografía líquida:

1. selección y tratamiento de la fase móvil

- se seleccionará un disolvente de grado superior o superior, que requiera agua destilada secundaria o ultrapura y que esté disponible para evitar la contaminación microbiana del sistema.

Después de la preparación de la fase móvil, es necesario volver a la temperatura ambiente para su reutilización, evitando la inestabilidad del rendimiento causada por la diferencia de temperatura.

- al usar la solución de sal tampón, debe filtrarse y limpiar el camino de flujo con agua pura antes y después de su uso, prohibiendo dejar la solución de sal tampón en el camino de flujo y dejarla Quieta. Al mismo tiempo, la columna debe enjuagarse primero con una baja proporción de fase orgánica (el contenido de fase orgánica no es inferior a 5), y luego conservarse con una alta proporción de fase orgánica para evitar la desalinización de amortiguación. Trate de evitar el uso de altas concentraciones de sal tampón de ácido fosfórico (> 10 mmol / l).

Trate de evitar el uso de cianuro puro como fase móvil para evitar que la polimerización de cianuro provoque que la absorción de líquido. Se recomienda almacenar en botellas marrones cuando no se usa.

2. especificaciones de funcionamiento

La conexión de la línea de alta presión está prohibida de desmontar bajo presión.

- se debe tener cuidado al ajustar el caudal, evitar cambios drásticos en la presión y la temperatura y evitar el impacto en el relleno interior de la columna.

- el cambio de la composición del disolvente para detectar la solución de la muestra debe hacerse de forma progresiva y, en particular, en la cromatografía de fase inversa, el disolvente orgánico no debe ser sustituido directamente por agua pura o viceversa.

La fuente de luz del detector ultravioleta debe enfriarse durante 30 minutos antes de apagarse.

3. mantenimiento de la seguridad

Los residuos líquidos deben recogerse por categorías y los residuos líquidos orgánicos no deben descargarse directamente.

Mantener y mantener regularmente el instrumento, como limpiar la aguja de inyección, reemplazar la junta, etc.