La Cromatografía líquida puede procesar mezclas con ingredientes complejos, grandes diferencias polares o baja estabilidad. Al seleccionar los gradientes adecuados de fase fija y fase móvil, puede lograr una separación efectiva de sustancias de alto punto de ebullición, macromoléculas e inestables térmicas (como proteínas, polisacáridos, residuos de plaguicidas) sin necesidad de calentamiento a alta temperatura, evitando problemas de descomposición de sustancias. Combinando un sistema de inyección de alta precisión y un detector de alta sensibilidad (como detector ultravioleta, detector de fluorescencia, detector de espectrometría de masas, etc.), puede satisfacer las necesidades de detección de trazas (concentraciones tan bajas como μg / l o incluso ng / l). En términos de análisis cualitativos, la composición de la sustancia se puede identificar con precisión a través de la doble verificación del tiempo de retención y el espectro característico o el espectro de masas; En términos de análisis cuantitativo, el uso de métodos maduros como el método estándar externo y el método estándar interno puede lograr un cálculo preciso de la concentración de sustancias.

La Cromatografía líquida utiliza el líquido como fase móvil, debido a la gran resistencia a la que se enfrenta el líquido cuando fluye a través de la columna, es necesario aplicar alta presión al portador (generalmente hasta 150 a 35.000 kpa) para garantizar que la fase móvil pueda pasar rápidamente por la columna. Al mismo tiempo, el caudal de la fase móvil en la columna también es mucho más rápido que el de la Cromatografía líquida clásica (generalmente hasta 1 a 10 ml / min), lo que reduce considerablemente el tiempo de análisis. Se han utilizado ampliamente detectores de alta sensibilidad, lo que ha mejorado aún más la sensibilidad del análisis. Por ejemplo, la sensibilidad del detector fluorescente puede alcanzar el nivel de 10g y el número de muestras es pequeño, generalmente solo se necesitan unos pocos litros.

En comparación con la cromatografía de gases, la Cromatografía líquida no está limitada por la volatilidad de las muestras y puede analizar compuestos orgánicos con alto punto de ebullición, poca estabilidad térmica y gran peso molecular relativo (más de 400). Estas sustancias representan casi 75 a 80 del total de compuestos orgánicos y, en principio, se pueden aplicar métodos de Cromatografía líquida de alto rendimiento para la separación y análisis. Por lo general, está equipado con un sistema automatizado de inyección de muestras y un software de procesamiento de datos, lo que hace que el proceso de operación sea más simple y rápido, reduciendo el riesgo de error manual.

Pasos de determinación de la cromatografía líquida:

1. pretratamiento de muestras

- extracción: pesar alrededor de 10 g (exactamente 0,1 g) de la muestra en un matraz cónico de 100 ml, añadir 60 ml de extracto Mixto y 2 g de cloruro de sodio y oscilar durante 30 minutos. Después de la extracción por embudo filtrante con un agujero filtrante de 80 - 120 micras, los residuos se lavan con un extracto mixto de 3 × 10 ML. Fusionar el filtrado y el líquido de lavado en un vaso de precipitados de 250 ML. Calentar en agua hirviendo durante 30 minutos, quitar, centrifugar a 3000r / MIN durante 20 minutos, enfriar en un refrigerador a 4 ° C durante 20 minutos, y luego extraer y filtrar a través de un embudo filtrante con un agujero de filtro de 40 a 80 micras para recoger el filtrado.

Purificación: si la composición de la muestra es compleja, se puede purificar aún más mediante extracción en fase sólida y otros métodos.

- concentración y determinación de la capacidad: concentrar el líquido de extracción en un soplador de nitrógeno cerca del seco, fijar la capacidad en un volumen adecuado con metanol y medirlo después de pasar la película filtrante microporosa de 0,22 micras.

2. preparación de instrumentos

Preparación de la fase móvil: elija un disolvente de grado HPC o superior, prepare la fase móvil proporcionalmente y filtre con una película filtrante de 0,22 micras, y cubra la tapa con un agujero de escape cuando la Use.

- instalación de la columna: instale correctamente la columna en la Caja de temperatura de la columna, conecte la tubería y asegúrese de que no haya fugas.

- equilibrio del sistema: enjuagar el sistema con fase móvil durante al menos 30 minutos hasta que la línea de base se estabilice.

3. análisis de la muestra

- carga de la muestra: inyecte la solución de la muestra en el anillo de inyección, preste atención a evitar la generación de burbujas.

Adquisición de datos: activar la estación de trabajo de cromatografía, iniciar la adquisición de datos y registrar el mapa de cromatografía.

4. procesamiento de datos

- cualitativa y cuantitativa: cuantitativa según la caracterización del tiempo de retención, utilizando el método estándar externo o el método estándar interno.

- Informe de resultados: calcular el contenido del compuesto objetivo en la muestra y emitir el informe de prueba.