2025año10En enero, el laboratorio de Farmacología veterinaria de la Universidad de Mapu y otros enBiomedicinas"Se publicó un estudio en la revista. El estudio se basa en Lactobacillus siLactobacillus paracasei), cultivos microbianos mixtos de Pichia membranosa y levadura de cerveza..LS) para nuevos probióticos, se discutió el uso externo.LSDermatitis atópica..AD) los efectos terapéuticos y preventivos del modelo de ratón y su mecanismo de inmunomodulación se han estudiado a través de experimentos in vitro.

resumen

Antecedentes/.Objetivo

Este estudio se centra en cultivos microbianos mixtos de Lactobacillus parquesus, Pichia pastoris y levadura de cerveza.LS) este nuevo probiótico tiene como objetivo explorar el uso externoLSDermatitis atópica..AD) efecto terapéutico y preventivo del modelo de ratón.

método

Mediante la detección de la ilIL(...)-10Y el factor de necrosis tumoral..TNF(...)αNivel, en la línea de células dendríticas del ratón..DC2.4) estudios en cursoLSEl efecto inmunomodulador de; A través de la atenciónIL-8Y la activación del timo regula las quimiotaxis..TARc) producción, en cutículas epidérmicas humanas estimuladas..Hashang) en evaluaciónLSEfectos antiinflamatorios; Finalmente, se estableció mediante un ungüento de ácaros del polvo localmente sensible.ADEn el modelo de ratón, la Inspección10% LSEfectos terapéuticos y preventivos de la aplicación externa. Monitoreo semanal de síntomas clínicos, espesor de la piel de la espalda y pérdida de agua a través de la epidermis..TEWL) después de la autopsia se analizó la respuesta inmune de los ganglios linfáticos retroauriculares.

resultado

LSMejora del tratamientoDC2.4Secreción celularIL-10yTNFα; yLSDespués del cocultivo, estimuladoHashangProducida por las célulasIL-8yTARcMenos. EnADEn el escenario terapéutico del modelo de ratón, aunque los síntomas clínicos, el grosor de la piel yTEWLNadaObvioCambios, peroLSEn los ganglios linfáticos locales del Grupo de tratamientoIgEPositivoC. B.Número de células yIL-4El nivel se reduce; yADEn comparación con los ratones del Grupo control,LSEl tratamiento preventivo se reduceADSíntomas.

Conclusiones

Los resultados del estudio muestran que,LSLa inmunomodulación y los efectos antiinflamatorios pueden prevenirseADOcurrencia y desarrollo.

ExperimentoMateriales yInstrumentos

1. Materiales experimentales

Cultivos microbianos mixtos..LS(...)

Líneas celulares: líneas de células dendríticas de ratón, líneas de cutículas epidérmicas humanas

Animales de experimentación:NC/NgaRatones

Reactivos:10%Suero bovino fetal, penicilina-Estreptomicina, humana recombinanteTNFα, InterferónIFN(...)γ. determinación de inmunoabsorción enzimática..ELISA) kits, anticuerpos monoclonales..PE/cianina7Anticoagulante de acoplamientoCD3,PEAnticoagulante de acoplamientoCD4Etc. ratonesEl TActivadoCD3/CD28Cizhu,Biostir AD(extracto de ácaros del polvo),4%Solución de sulfato de sodio de laurilo

2. Instrumentos experimentales

El CellDrop™Sistema de recuento celular

BD FACSAria™ IIIClasificador celular

ASCH VAPOSCANMedidor de pérdida de agua percutánea

Proceso experimental

1. Experimentos in vitro

·DC2.4Experimentos celulares: será70%ConfluenciaDC2.4Células..1 × 10Células individuales/ 100 μL) vacunación a96En placas de cultivo de poros, expuestas a diferentes concentracionesLS, a travésELISADetección cuantitativa en el líquido sobrenadanteIL-10yTNFαConcentración.

·HashangExperimentos celulares: será70%ConfluenciaHashangCélulas..1 × 10Células individuales) vacunadas para contener100 μLMedio de cultivo96En el tablero de cultivo de agujeros, se utilizan personas recombinantesTNFαyInterferón gammaestímulo1Horas después, Únete100 μLCon diferentes concentracionesLS, incubar24Horas, pasanELISADetección cuantitativa en el líquido sobrenadanteIL-8yTARcConcentración.

2. Experimentos in vivo

·ADEstablecimiento de un modelo de ratón: a través de la sensibilización localBiostir AD(extracto de ácaros del polvo) y aplicación local4%Solución de sulfato de sodio de laurilo, enNC/NgaEstablecido en ratonesADModelo.

·Protocolo de administración: el Grupo de tratamientoADDespués de la enfermedad.19Días (promedioADLa puntuación es2.07) a33Días, aplicación local diaria0,1 ml/solo10% LSSolución..n = 8) o medios solubles en agua destilada..n = 7); El Grupo de prevención0Del cielo al primero18Días..ADAntes de la inducción) se realiza la administración local.

·Monitoreo de indicadores: monitoreo semanal durante el experimentoTEWL, espesor de la piel de la espalda y puntuación clínica..0 - 4Puntos, que corresponden a asintomáticos, leves, moderados, graves y extremadamente graves, respectivamente).

ASCH VAPOSCANMedidor de pérdida de agua percutánea

·Recogida y análisis de muestras: después de la sensibilización1Días, recolección de ganglios linfáticos retroauriculares en ratones..LN), preparar suspensión unicelular y contar; a través deBD FACSAria™ IIIEl clasificador celular analiza el fenotipo celular; Suspensión unicelular de ganglios linfáticos5 × 10Células individuales/.Kong) con ratonesEl TActivadoCD3/CD28Incubación de cuentas magnéticas24Horas,ELISADetección en el líquido superiorInterferón gamma,IL-4,IL-13yIL-17Nivel; Se realizó una evaluación histopatológica semicuantitativa a ciegas de muestras de piel, utilizando0 - 3Sistema de puntos..0Para ser normal,1Es leve,2Es moderado,3Es grave).

Conclusiones experimentales

En experimentos in vitro,LSMejora del tratamientoDC2.4Secreción celularIL-10yTNFαY puede reducir la estimulaciónHashangProducción celularIL-8yTARc, mostrando Dependencia de la dosis.

EnADEn la configuración terapéutica del modelo de ratón,LSAunque noObvioCambios en los síntomas clínicos, espesor de la piel yTEWLSin embargo, se mejoraron las manifestaciones histológicas como la hiperplasia cutículas y la costra epidermica, al tiempo que se redujeron los ganglios linfáticos locales.IgEPositivoC. B.Número de células yIL-4Nivel.

El tratamiento preventivo es más eficazObvio,LSPuede reducirADSíntomas clínicos y grado de lesiones histopatológicas en ratones, reduciendo el efecto en los ganglios linfáticosEl TNúmero de células yIL-13Nivel.

En general, cultivos microbianos mixtos de Lactobacillus Casei seco secundario, Pichia pastoris y levadura de cerveza..LS) tiene actividad inmunomoduladora y antiinflamatoria, yADEl efecto preventivo es mejor que el efecto terapéutico.ADLas primeras intervenciones de regulación del microbioma local proporcionan estrategias potenciales.